Traj18基因敲除免疫缺陷小鼠模型

該品系可用于NKT細胞相關的多種疾病及發育相關研究。

動物模型的制備和應用實驗必須在具備相應資質的實驗室開展。動物模型的制備、應用過程中的監督管理、處置措施、對環境和生態影響等應符合國家相關法律規定。

通過流式細胞儀對敲除小鼠的胸腺、脾臟和肝臟的NKT細胞進行了分析，包括B220、CD3ξ，CD4，CD8α，TCRβ，相關的標記購買自BD公司。為驗證該基因對腫瘤的抵抗作用，選取肝臟轉移的B16黑色素瘤，對小鼠進行靜脈注射，同時選擇αGalCer-DC細胞注射作為另一實驗組。

流式細胞儀分析，Traj18基因敲除小鼠的NKT細胞在胸腺、脾臟和肝臟都沒有表達：

接種腫瘤實驗表明，該敲除小鼠對腫瘤的耐受能力下降:

背景小鼠：C57BL/6J

構建信息：應用CRISPR/Cas介導的基因組工程技術建立 Traj18基因敲除小鼠模型；小鼠Traj18基因(Gene ID: 100124371)位于小鼠14號染色體上，小鼠的Traj18基因為目的位點：

將構建兩對gRNA靶向載體，并經測序證實。體外轉錄產生的Cas9mRNA和gRNA將被共同注射到受精卵中，以促進KO小鼠的產生。用PCR進行仔鼠基因分型，然后進行序列分析；將Traj18基因的gRNA和Cas9mRNA共注射到受精卵中，以產生有針對性的敲除后代。通過PCR鑒定F0代首建鼠，隨后進行序列分析，然后與野生型小鼠繁殖獲得F1代，再進行鑒定，F1代再進行繁殖，最終獲得純合子小鼠。PCR反應體系及條件為

天然殺傷T細胞（NKT）是T淋巴細胞的一個獨特的子集，它通過細胞因子的快速釋放和與免疫系統其它細胞直接作用來調節免疫反應。因此NKT細胞作為先天和適應性免疫系統之間的重要聯系，是免疫療法的有前景的靶點。I型NKT細胞，也稱iNKT細胞，是小鼠中最常見的NKT細胞，在人類中具有相似的特性。

TRAJ18基因與TRAv11基因結合，形成具有適當抗原特異性的iNKT細胞受體（Tcr）。有報道指出敲除TRAJ18基因的小鼠，約60%的TCRα多樣性缺乏。

參考文獻：

1. Lower TCR repertoire diversityin Traj18-deficient mice.

2. Generation of NovelTraj18-Deficient Mice Lacking Vα14 Natural Killer T Cells with an Undisturbed TCell Receptor α-Chain Repertoire.

3. Mutation of the Traj18 genesegment using TALENs to generate Natural Killer T cell deficient mice.