病毒核酸檢測試劑盒的原理是什么??《病毒學檢驗》大學復習知識點總結習題答案

不幸的孩子，是沒有用過好試劑盒做實驗吧。你下面說的那些，從提取rna，消化基因組，反轉錄，加定量pcr的整個進程，假設用qiagen的盒子，2h多一點就能拿到結果了。

如今鑒定病毒的盒子，應該是進一步優化過的，差不多2小說搞定。

我國主要的幾種檢測試劑盒都是基于RT-PCR原理。由于需求檢測的病毒樣本濃度有高有低，高的容易檢測，低濃度就會漏掉。所以PCR的方法就把病毒基因擴增很多倍，到達可以檢測出來的濃度?；静僮魅缦拢? 01 搜集咽拭子等病毒樣本，經過試劑打碎維護病毒的蛋白質殼子，萃取病毒RNA。一方面是萃取，另一反面，打碎之后就沒有了感染性，相對平安一些。

02 由于這次新冠肺炎是單鏈RNA病毒，所以要先轉換成cDNA。這個可以類比像是視頻文件,mp4,rmvb,avi這些都是罕見格式，同一個視頻不同格式，意思都一樣，可以相互轉換。

03 慣例PCR反響，加熱到94℃把DNA拉鏈拉開，之后再55℃-60℃讓引物，就是拉鏈扣區分套在兩條拉鏈上，再升溫到72℃讓拉鏈自己復制，用左拉鏈做模板造一個右拉鏈，用右拉鏈做模板造一個左拉鏈。這樣折騰一次為一個循環，RNA數量翻一倍。之后再折騰25-30次。這樣就算很大批的病毒這個時分也顯現出來了。

PCR操作方法 這個方法很主流，也很經典。但是這個操作步驟太多，而且每次都是微量，手一抖就完蛋了。另外引物（就是拉鏈扣）的質量也是關鍵，假設復制錯了拉鏈，那么整個檢測前功盡棄。 當然還無機器清洗的效果，假設上一個陽性樣本檢測之后，沒有洗潔凈設備，下一個原本陰性患者能夠就會假陽性被誤診。中國大三甲醫院自己都有PCR檢測和人員，流程比擬熟練。美國歐洲很多醫院偏?？?，綜合性超大型少一些，原本很多檢驗都是委托外包第三方實驗室。遇到疫情，著急出結果自己上手，能夠有手法不熟練的狀況。假設又正好運用了某些中國的無證試劑盒廠商出品的無證試劑，多重誤差疊加，準確度就會崩盤。 那么雅培檢測試劑盒和國際主流試劑盒有啥不一樣呢？ 這次雅培的五分鐘檢測試劑盒用的是一個完全不同的反響體系，簡稱RPA（重組酶聚合酶擴增），也叫做恒溫擴增技術。中心就是用三個主要原料：單鏈核酸重組酶、單鏈DNA結合蛋白(SSB)和鏈置換DNA聚合酶，在一個恒定溫度下37度到42度都可以，直接把DNA套成一個環，在本地施任務業，直接套用引物，復制目的DNA。 RPA技術優勢很清楚： 01 特別快，傳統PCR要45分鐘，由于要重復升溫降溫。RPA由于是恒溫，所以只需求3-10分鐘。

02 靈敏度高，由于是高度定向擴增，所以樣品即使有點兒雜質也OK，免除了前處置環節，盡量多的保管了樣本。

03 溫度控制要求低，普通是加熱到40℃，但是在緊急狀況下，貼在人身上用人體的體溫36℃、37℃也沒效果。甚至在室溫25℃，也是可以運轉，就是慢點兒，要等一個小時而已。

04 適用性強，面對RNA病毒，直接在試劑里參與逆轉錄酶就好，一鍋端。

益處是很多，但是畢竟RPA也只能設計兩個引物，假設設計不好，能夠就會錯誤的把其他病毒錯檢成新冠。但是雅培果真行業大佬，設計巧奪天工，對照實驗中基本面對少量其他病毒，都沒有發生錯誤。

反過去，RPA由于太靈敏，之前的樣本有一點兒殘留在機器里，下一個樣本就不準了。所以雅培的設計是徹底的全封鎖一次性試劑盒。機器和樣本不直接接觸，只要激光掃碼這一塊。一切的試劑盒全部都是一次性運用，并且外部封鎖樣本處置。這樣就防止了樣品交叉污染，由此可以釋放檢測才干，縱情地檢測更低濃度的病毒。因此可以釋放檢測才干，縱情去檢測低濃度病毒。

好東西值得吹噓。畢竟一次只能檢測一個，關于窮人和偏遠地域是OK。但是關于大規模檢測的中央，比如說美國方艙醫院，PCR方案短期內還是沒法被替代。 引文： 1, Abbott RealTime SARS-CoV-2 For use under an Emergency Use Authorization (EUA) Only http://www.fda.gov/media/136258/download 2，ID NOW? http://www.alere.com/en/home/product-details/id-now.html 3，重組酶聚合酶擴增技術研討停頓 http://html.rhhz.net/SWJSTB/html/2016-6-47.htm 靠譜的安康醫療科普節目