脊髓灰質(zhì)炎恒河猴模型

１. 病毒滴度的變化：接種病毒后，動(dòng)物肺組織PVM?RT-PCR檢測(cè)可檢出病毒，病毒滴度在感染后３天達(dá)到高峰，并可維持至７日，隨后滴度下降。

２. 感染動(dòng)物體重較之未感染動(dòng)物體重下降，動(dòng)物多出現(xiàn)豎毛，弓背等癥狀。嚴(yán)重者體重下降，行動(dòng)出現(xiàn)遲緩，耳及尾可見紫紺，震顫，處于瀕死狀態(tài)。用于藥效評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)控制感染劑量，降低因感染出現(xiàn)的急性死亡（４日內(nèi)）。６~７日的死亡率可作為藥效評(píng)價(jià)的指標(biāo)。

３. 病理?yè)p傷以充血、出血、肺組織水腫以及炎細(xì)胞浸潤(rùn)為標(biāo)準(zhǔn)，應(yīng)測(cè)定肺間隔，以及肺通氣水平，進(jìn)而評(píng)估肺呼吸能力。

４. 炎癥因子重點(diǎn)關(guān)注IL-1β，IL-6，IL-18，MCP-1，IFN-γ等。

進(jìn)行人類RSV 肺炎感染研究，國(guó)內(nèi)外推薦使用PVM做替代實(shí)驗(yàn)。PVM的毒株不同，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的品系不同，動(dòng)物的臨床表型也會(huì)存在差異。本模型的表型與國(guó)外進(jìn)行的模型研究表型相似，在急性期的死亡率較低，有較長(zhǎng)的臨床治療的窗口，可用于免疫治療的療效評(píng)價(jià)。

PVM為低于人間傳染病名錄三級(jí)安全風(fēng)險(xiǎn)的病原，人類感染的風(fēng)險(xiǎn)低，但不排除對(duì)免疫功能缺陷者的致病性。

PVM是嚙齒類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物必須排除的病原體，對(duì)動(dòng)物有致病性。會(huì)干擾其他實(shí)驗(yàn)研究。

鑒于此，此感染實(shí)驗(yàn)必須在BSL-2級(jí)以上的生物安全實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病原學(xué)實(shí)驗(yàn)，在ABSL-2實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。

本模型主要表現(xiàn)為腦組織的病理學(xué)改變：注射后４８ ｈ內(nèi) 死亡或出現(xiàn)非特異性麻痹癥狀者剔除不計(jì)，中途死亡及到期處死動(dòng)物，做中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理組織學(xué) 檢查。動(dòng)物在給藥2１ｄ 后，進(jìn)行安樂死并解剖。將脊髓法中的半切面評(píng)分法用于腦內(nèi)法病理改變的評(píng)價(jià)方法，分別對(duì)腦組織、脊髓頸膨大和腰膨大的半 切面病變進(jìn)行評(píng)分，并對(duì)這三個(gè)部位的平均病變分 值進(jìn)行計(jì)算，根據(jù)分值并參考具體情況進(jìn)行病變程度的判定。評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)如下： ０分，未見 病變；１分，輕微病變，僅有炎細(xì)胞浸潤(rùn)，未見神經(jīng)元 損害；２ 分，輕度病變，炎細(xì)胞浸潤(rùn)伴有少量的神經(jīng)元損害；３ 分，中度病變，炎細(xì)胞浸潤(rùn)伴有廣泛的神經(jīng)元損害；４ 分，重度病變，大量的神經(jīng)元損害，伴或不伴有炎細(xì)胞浸潤(rùn)。

使用腦立體定位儀將微量注射器針頭插入丘腦，在兩側(cè)丘腦分別注入０暢５ ｍＬ脊髓灰質(zhì)炎疫苗樣 品，原倍濃度及１０－１濃度各 １０只。 注射后４８ ｈ內(nèi) 死亡或出現(xiàn)非特異性麻痹癥狀者剔除不計(jì)，中途死亡及到期處死動(dòng)物，做中樞神經(jīng)系統(tǒng)病理組織學(xué) 檢查。動(dòng)物在給藥 ２１ ｄ 后，進(jìn)行安樂死并解剖。完整 取出腦組織及脊髓，１０％甲醛溶液充分固定后，進(jìn)行取材。 取材時(shí)首先尋找腦頂葉區(qū)注射點(diǎn)，在注射點(diǎn)前后各取一個(gè)切面，以確保取材部位包含針跡。取 材部位包括：額葉、頂葉、注射點(diǎn)、顳葉、枕葉、海馬、 基底節(jié)、丘腦（以上部位左右大腦雙側(cè)取材）、中腦、 小腦、腦橋、延髓、頸膨大、腰膨大。

一、疾病名稱

脊髓灰質(zhì)炎是一種急性傳染病，傳播廣泛，病原為脊髓灰質(zhì)炎病毒。 此病毒常侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，損害脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞，導(dǎo)致肢體松弛性 麻痹，多見于兒童，故又名小兒麻痹癥

二、疾病臨床表現(xiàn)及致病機(jī)制

是一種急性傳染病，傳播廣泛，病原為脊髓灰質(zhì)炎病毒。此病毒常侵犯中樞神經(jīng)系 統(tǒng)，損害脊髓前角運(yùn)動(dòng)神經(jīng)細(xì)胞，導(dǎo)致肢體松弛性麻痹，多見于兒童，故又名小兒麻痹癥

目前包括我國(guó)在內(nèi)的１４０ 多個(gè)國(guó)家仍以口服脊髓灰質(zhì)炎減毒活疫苗作為主要 預(yù)防措施，因疫苗可能會(huì)在某些情況下恢復(fù)神經(jīng)毒 性而引起脊髓灰質(zhì)炎病變，對(duì)其安全性進(jìn)行恰當(dāng)評(píng)價(jià)是非常重要的工作。

三、模式動(dòng)物

獼猴在進(jìn)化上與人類高度同源，種屬差異小，在組織結(jié)構(gòu)和生理特征上與人類極為相似，這一突出特點(diǎn)奠定了恒河猴動(dòng)物在藥物生產(chǎn)和評(píng)價(jià)、功能和進(jìn)化比較基因組學(xué)研究、人類重大疾病模型復(fù)制和應(yīng)用、再生醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域中不可或缺的優(yōu)勢(shì)地位。