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條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型

健明迪檢測提供的條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型,討論與結論 該模型通過長期觀察普通狼瘡小鼠模型,待其到40周齡時,檢測其dsDNA等,結合皮膚癥狀變化,來確定慢性狼瘡皮膚病模型的建立,具有CMA,CNAS認證資質。
條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型
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討論與結論

該模型通過長期觀察普通狼瘡小鼠模型,待其到40周齡時,檢測其dsDNA等,結合皮膚癥狀變化,來確定慢性狼瘡皮膚病模型的建立。目前國際上尚欠缺類似模型,為研究狼瘡皮膚病發病機制提供了工具。

生物安全性

模型動物飼養在武漢大學人民醫院動物房SPF級動物實驗室,實驗動物使用許可證SYXK(鄂)2015-0027。

(1)建筑特點

門采用專用凈化密閉門并配備觀察窗。單向走道呈順時針走向設計。屏障系統內共有大鼠飼養室1間,小鼠飼養室3間,隔離觀察室1間,實驗準備室1間,潔物存放室1間,清洗消毒室1間。此外,屏障系統外配有監控室、機房和配電室等。

(2)設計參數

室內溫度:20~26°C;日溫差:≤4°C;相對濕度:40%~70%;換氣次數:15~20次/h;氣流速度:≤0.2m/s;壓強梯度:20~50Pa;空氣潔凈度:7級;菌落數:≤3個/皿;氨濃度:≤14mg/m3;噪聲:≤60dB;Z低工作照度:≥200lx;動物照度:15~20lx;晝夜明暗交替時間:12/12h。

(3)通風和空調系統

動物實驗室采用全新風中央空調通風系統。空氣經過初、中、三級過濾器后進入實驗室內環境。

(4)照明系統

一更、淋浴、二更、氣閘、清潔走道、潔物存放處、污物走道、緩沖間和清洗消毒間、動物飼養室、實驗準備間、隔離觀察室和功能實驗室等安裝有手動和自動開關,根據實際需要,調節控制室內照明燈。未啟用房間、清潔走道、潔物存放處、污物走道等在每日中午12點和晚上8點開啟紫外線燈照射1h。

(5)通訊系統

因為SPF級動物實驗室的環境和設施具有特殊要求,人員進入后不能隨意出入,而室內外的聯系又十分重要,故室內各房間均安裝內部電話機,按照房間順序編排電話號碼,各室內電話可相互連通,并均與監控室總機保持聯系,保證實驗室內外信息的及時溝通。

(6)監控系統

對SPF級動物實驗室的出入口、走道、實驗動物飼養室、功能操作室等重要位置均安裝了可作270°旋轉的攝像機,能夠及時了解設施的運行狀態;也能有效督促實驗人員執行科學的操作規程,避免人為因素造成室內環境和設施的污染;并對整個實驗期間的動物狀態和反應進行觀察,減少對動物的滋擾。

(7)供水系統

SPF級實驗動物飲用水以純凈水為宜。本實驗室采用管道供水,將處理后的純凈水用塑膠管道輸送到屏障系統內實驗準備室,設置接水槽,為實驗動物供應滅菌的飲用水和屏障系統內用水。要經常更換和清洗輸水管道,清洗籠具的用水添加適當比例的84消毒液。

(8)供電系統、警報系統和消防設施

SPF級動物實驗室要求全天候不間斷供風和供電,如果出現故障,不能及時發現和處理,就可能導致環境設施的污染、動物感染或死亡,造成嚴重后果。因此應對SPF級動物實驗室使用獨立穩定的供電系統,并配備有應急電源。在中央空調機房控制室安裝風機故障警報系統,以便及時檢修和維護,保證設施的安全運行。

(9)消毒滅菌設備

為防止外界物品進入SPF級動物實驗室時所攜帶的細菌污染室內環境和造成動物交叉感染,按照不同物品的特性,進行紫外線照射消毒、渡槽消毒液消毒或專用的機動門真空滅菌器消毒。

(10)動物飼養籠具

飼養大、小鼠的籠具聚碳酸脂材料的塑膠籠具,具有高透明、耐高壓、耐高溫、耐酸堿等特點。通用的不銹鋼籠具長、寬、高分別為40、30、20cm,適用于單籠飼養有特殊要求的實驗動物,配有底盤和食槽,確保實驗動物有充足的采食和活動空間,同時也保證室內環境的清潔。

(11)墊料的選擇和使用

在使用塑膠墊料時,墊料是大小鼠直接接觸的鋪墊物,起到吸濕、保暖和造窩的作用。墊料的好壞直接影響到大小鼠術后的恢復、生長發育和繁殖性能。目前,所使用的墊料主要有玉米秸墊料、刨花墊料。

(12)飼料配制

大小鼠的生產型飼料和維持型飼料必須嚴格按照國家標準,進行科學配制生產。每半年檢測一次飼料的微生物指標和有效營養成分指標,保證飼料的質量。

評價驗證

RNVU1-18屬于U1小核RNA(snRNA)的假基因。U1 snRNA作為核糖核蛋白(RNP)復合體的一部分,是剪接體的重要組成部分,負責pre-mRNA的剪接。同時,可促進轉錄起始、以抑制多聚腺苷酸化等。

制備方法

F0代構建:

研究背景

RNVU1-18屬于U1小核RNA(snRNA)的假基因。U1 snRNA作為核糖核蛋白(RNP)復合體的一部分,是剪接體的重要組成部分,負責pre-mRNA的剪接。U1 snRNA的5 '端和5 '剪接位點堿基對,位于內含子的5 '端外顯子/內含子交界處,并定義了第一次分裂發生的位置。除此之外,U1 snRNA具有額外的生物學作用,包括:U1 snRNA與TFIIH復合體的cyclin H成分相互作用,并通過增強一般轉錄因子與蛋白編碼基因啟動子的關聯來促進轉錄起始;當U1 snRNP與位于末端外顯子下游的隱性5 ' s結合時,可以抑制多聚腺苷酸化;U1 snRNP也可以保護早期轉錄本免受發生在pre-mRNA轉錄本體內隱聚(A)位點的過早切割/聚腺苷酸化事件。在人類中,U1 snRNA基因是由位于1號染色體短臂上的多基因家族編碼的。此外,大量的U1 snRNA假基因存在于整個基因組中。U1 snRNA假基因有三種不同的類型,它們由DNA和RNA介導的機制產生。其中U1 snRNA I類偽基因與U1 snRNA基因有相當多的5 '和3 '側翼序列同源性,并與兩個基本啟動子元件,遠端序列元件(DSE)和近端序列元件(PSE)保持良好的同源性。假基因定位于1號染色體長臂上的一個單獨位置(1q12-21) 。經序列分析,RNVU1-18編碼一種與U1 snRNA相同的snRNA,因此可能參與了U1 snRNA池的作用,這說明哺乳動物細胞中很大一部分的U1 snRNA可能來自于vU1 snRNA基因。

模型信息

中文名稱:條件性RNVU1-18 過表達小鼠模型

英文名稱:RNVU1-18 conditional expressing mouse model

類型:代謝性疾病動物模型

分級:NA

用途:用于代謝相關疾病研究。

研制單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

保存單位:中國醫學科學院醫學實驗動物研究所

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