大鼠脊髓損傷模型

該模型采用了CRISPR/Cas9技術(shù)，創(chuàng)新性地結(jié)合了人類(lèi)遺傳學(xué)與動(dòng)物基因編輯技術(shù)，首次在小鼠上重構(gòu)了與人類(lèi)疾病類(lèi)似的遺傳模式，在Tbx6基因上同時(shí)引入無(wú)效突變和promotor區(qū)域的亞效等位基因，并將二者結(jié)合，形成復(fù)合雜合突變并獲得相應(yīng)的脊柱畸形表型。該模型是國(guó)際上首創(chuàng)的復(fù)合雜合突變脊柱畸形表型，對(duì)于解釋先天性脊柱側(cè)凸的分子機(jī)制和發(fā)病過(guò)程具有極高的研究討論價(jià)值。

該基因編輯小鼠將在屏障隔離環(huán)境（北京協(xié)和醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心）內(nèi)進(jìn)行繁育、飼養(yǎng)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)，其監(jiān)督管理措施由動(dòng)物中心負(fù)責(zé)。屏障隔離期間將保持清潔，保證其具有SPF級(jí)別清潔度，減少感染及發(fā)病幾率。嚴(yán)格實(shí)驗(yàn)室管理，防止小鼠外泄，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)將禁止其與野生型小鼠交配，保證編輯基因組序列不向自然界流通。上述措施將保證該動(dòng)物模型的生物安全性，避免其影響生態(tài)環(huán)境。

1. 生物學(xué)特征

手術(shù)組與假手術(shù)組相比，排尿受限，體型消瘦。

2. 臨床表現(xiàn)

手術(shù)時(shí)可見(jiàn)大鼠尾部擺動(dòng)，大鼠術(shù)后蘇醒，雙下肢癱瘓。

3. 發(fā)病過(guò)程

手術(shù)后即發(fā)病。

4. 臨床診斷

BBB（大鼠脊髓損傷）評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：將大鼠后肢運(yùn)動(dòng)分為22個(gè)等級(jí)，完全癱瘓為分，完全正常為21分，兩者之間根據(jù)功能恢復(fù)程度分別定為1-20分。

（一）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及材料:

1. 8周齡SD大鼠，雌性；

2. 常規(guī)手術(shù)器械、顯微鏡、臺(tái)燈；

3. 抗生素、2%戊巴比妥鈉、碘伏、75%乙醇。

（二）制作方法

1. 大鼠麻醉后，固定，備皮，碘伏擦拭，分離皮膚、皮下組織，沿肌肉走向分離脊椎旁肌肉；

2. 確定T8-T10椎體位置，用鑷子略加起T9椎體上端，用鉗字去除椎體和椎板，暴露T9段脊髓；

3. 在顯微鏡和光源下用顯微剪去除T9-T10段脊髓；

4. 壓迫止血，用生理鹽水沖洗創(chuàng)面，縫合肌肉和皮膚；

5. 術(shù)后每天給予抗生素，以防感染。

1.物種：大鼠

2.品系：SD

3.人類(lèi)疾病：脊髓損傷

4.傳染性：無(wú)

5.微生物：無(wú)

6.類(lèi)別：疾病模型